Optimización de la transformación genética y regeneración de ciruelo europeo "D´Agen" mediante un enfoque basado en diseño y optimización de experimentos
Póster
| Autores principales: | , , , , |
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| Lenguaje: | Español |
| Publicado: |
Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad Nacional de Jujuy
2022
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| Materias: | |
| Acceso en línea: | http://hdl.handle.net/20.500.12123/13721 |
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| author | Soria, Florencia Elizabeth Galiñales, Antonella E. Bossio, Adrian Ezequiel Valentini, Gabriel Hugo Sanchez, Gerardo |
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| author_sort | Soria, Florencia Elizabeth |
| collection | INTA Digital |
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| institution | Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA -Argentina) |
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| publishDate | 2022 |
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| publisher | Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad Nacional de Jujuy |
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| spelling | INTA137212022-12-27T12:15:50Z Optimización de la transformación genética y regeneración de ciruelo europeo "D´Agen" mediante un enfoque basado en diseño y optimización de experimentos Soria, Florencia Elizabeth Galiñales, Antonella E. Bossio, Adrian Ezequiel Valentini, Gabriel Hugo Sanchez, Gerardo Prunus domestica Regeneración in Vitro Transformación Genética Protocolos Biotecnología Vegetal In vitro Regeneration Genetic Transformation Protocols Plant Biotechnology DOE Design of Experiments Plant Growth Regulators PGRs Reguladores de Crecimiento Póster Un requisito clave para la obtención de líneas transformadas y/o editadas genéticamente es el desarrollo de un protocolo simple, eficiente y reproducible de regeneración de plantas completas. Sin embargo, las especies del género Prunus se caracterizan por ser recalcitrantes al cultivo in vitro. El objetivo de este trabajo fue desarrollar un protocolo eficiente para la regeneración in vitro y transformación para el ciruelo europeo 'D’Agen'. A través de una estrategia de Diseño y Optimización de Experimentos (DOE), se estudió el efecto de reguladores de crecimiento sobre variables respuestas de cada etapa del cultivo in vitro, con el fin de maximizar la eficiencia total del proceso. Los explantos iniciales fueron cotiledones de semillas obtenidas de la colección de germoplasma de la EEA San Pedro (INTA). Los tratamientos quedaron definidos para cada etapa en función del tipo de diseño (factorial o central compuesto) y del tipo, concentración y combinación de reguladores de crecimiento: TDZ, 2,4-D e IBA en la regeneración de brotes, BAP e IBA para multiplicación y elongación y ANA, KIN e IBA en el enraizamiento. Para la optimización de la transformación de cotiledones se utilizó la cepa C58C1 de Agrobacterium provista con plásmido pCambia2301-GUS y se determinó mediante análisis histoquímico la expresión transciente del gen marcador de la β-glucuronidasa (GUS). Se evaluaron tres OD de infección, dos métodos de enfrentamiento (vacío y sonicación) y el efecto de la acetosiringona en co-cultivo. El protocolo desarrollado permitió obtener un porcentaje elevado de regeneración in vitro (30-40%), y se pudo determinar las mejores condiciones de transformación transciente. Según nuestro conocimiento, este trabajo constituye el primer reporte de regeneración in vitro eficiente del ciruelo 'D’Agen'. Asimismo, se probó la eficiencia del DOE para optimizar el cultivo in vitro, lo que abre la posibilidad de extrapolar la estrategia de regeneración a otras especies del género. EEA San Pedro Fil: Soria, Florencia Elizabeth. lnstituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria San Pedro; Argentina. Fil: Galiñales, Antonella E. Universidad Nacional del Noroeste de la provincia de Buenos Aires. Escuela de Ciencias Agrarias, Naturales y Ambientales; Argentina. Fil: Bossio, Adrian Ezequiel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Genética; Argentina. Fil: Valentini, Gabriel Hugo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria San Pedro; Argentina Fil: Sánchez, Gerardo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria San Pedro; Argentina 2022-12-27T12:12:32Z 2022-12-27T12:12:32Z 2022 info:ar-repo/semantics/documento de conferencia info:eu-repo/semantics/conferenceObject info:eu-repo/semantics/publishedVersion http://hdl.handle.net/20.500.12123/13721 spa info:eu-repograntAgreement/INTA/2019-PE-E6-I115-001/2019-PE-E6-I115-001/AR./Edición génica, transgénesis y mutagénesis como generadores de nueva variabilidad en especies de interés agropecuario 2019-PE-E6-I115-001.A001/Desarrollo de un nuevo sistema de mejora biotecnológica para el duraznero info:eu-repo/semantics/openAccess http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/ Creative Commons Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0 International (CC BY-NC-SA 4.0) application/pdf Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad Nacional de Jujuy IX Encuentro Latinoamericano Prunus sin Fronteras. San Salvador de Jujuy, Argentina, 12 al 14 de octubre del 2022 |
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