Diagnóstico molecular y estudio de la epidemiologia del fitoplasma de la hoja pequeña de la Gliricidia (Gliricidia sepium)

En el madreado se ha detectado una enfermedad asociada con un fitoplasma, llamada enfermedad de la Hoja Pequeña de la Gliricidia (EHPG). Se caracterizaron los síntomas que consisten en: reducción del tamaño de los foliolos, distorsión foliar, proliferación de brotes y brotes débiles. El síntoma amar...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autor principal: Saballos, Ana
Otros Autores: Doyle, María
Formato: Tesis
Lenguaje:Español
Publicado: Escuela Agrícola Panamericana, Zamorano 2014
Materias:
PCR
ADN
Acceso en línea:https://bdigital.zamorano.edu/handle/11036/2726
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spelling ZAMORANO27262023-03-24T15:54:43Z Diagnóstico molecular y estudio de la epidemiologia del fitoplasma de la hoja pequeña de la Gliricidia (Gliricidia sepium) Saballos, Ana Doyle, María Rosas, Juan C. Gladstone, Sally PCR Gliricidia sepium Fitoplasma ADN Biología molecular Epidemiologia En el madreado se ha detectado una enfermedad asociada con un fitoplasma, llamada enfermedad de la Hoja Pequeña de la Gliricidia (EHPG). Se caracterizaron los síntomas que consisten en: reducción del tamaño de los foliolos, distorsión foliar, proliferación de brotes y brotes débiles. El síntoma amarillamiento no resultó confiable para la identificación de la enfermedad en el campo. Una enfermedad de esta naturaleza puede causar graves pérdidas económicas ya que debido al declinamiento gradual de los árboles es fácil que pase desapercibida hasta encontrarse en un nivel de severidad y expansión grandes, Como primer paso para estudiar la epidemiologia de la enfermedad he necesario optimizar una técnica apropiada para la detección del patógeno. Se utilizó la técnica molecular para amplificar ácidos nucleicos, conocida como Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR, por sus siglas en inglés, Polymerase Chain Reaction). Se realizó la optimización de los factores críticos del proceso. Entre los principales se incluyen: el método de extracción y máximo tiempo de almacenaje de las muestras frescas, la concentración de los componentes esenciales para la reacción y las temperaturas óptimas de las tres fases de cada ciclo. Con la técnica optimizada se llevaron a cabo estudios de transmisión de la enfermedad. Se encontró transmisión a través de estacas. Aunque el nivel de severidad de la enfermedad afecta negativamente el enraizamiento, estacas de plantas asintomáticas infectadas y de plantas con síntomas moderados enraízan y presentan infección del patógeno en las nuevas plantas. Se detectó ADN del fitoplasma en plántulas germinadas de semillas de plantas enfermas. Esto sugiere una posible transmisión a través de semillas. Los insectos Empoasca hastosa, Lopidea murray, Alconeura sp. , Ollariamus sp. , Hydatothrips sp se identificaron como posibles vectores de EHPG, ya que se le detectó ADN del fitoplasma en sus tejidos. 1. índice de cuadros 2. Índice de figuras 3. Índice de anexos 4. Introducción 5. Revisión de literatura 6. Materiales y métodos 7. Resultados y discusión 8. Conclusiones 9. Recomendaciones 10. Bibliografía 11. Anexos 2014-08-14T19:41:27Z 2014-08-14T19:41:27Z 1999 Thesis https://bdigital.zamorano.edu/handle/11036/2726 spa 71 p. Copyright, Escuela Agrícola Panamericana,2014 http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/es openAccess application/pdf application/pdf Zamorano Escuela Agrícola Panamericana, Zamorano
institution Universidad Zamorano
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Saballos, Ana
Diagnóstico molecular y estudio de la epidemiologia del fitoplasma de la hoja pequeña de la Gliricidia (Gliricidia sepium)
description En el madreado se ha detectado una enfermedad asociada con un fitoplasma, llamada enfermedad de la Hoja Pequeña de la Gliricidia (EHPG). Se caracterizaron los síntomas que consisten en: reducción del tamaño de los foliolos, distorsión foliar, proliferación de brotes y brotes débiles. El síntoma amarillamiento no resultó confiable para la identificación de la enfermedad en el campo. Una enfermedad de esta naturaleza puede causar graves pérdidas económicas ya que debido al declinamiento gradual de los árboles es fácil que pase desapercibida hasta encontrarse en un nivel de severidad y expansión grandes, Como primer paso para estudiar la epidemiologia de la enfermedad he necesario optimizar una técnica apropiada para la detección del patógeno. Se utilizó la técnica molecular para amplificar ácidos nucleicos, conocida como Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR, por sus siglas en inglés, Polymerase Chain Reaction). Se realizó la optimización de los factores críticos del proceso. Entre los principales se incluyen: el método de extracción y máximo tiempo de almacenaje de las muestras frescas, la concentración de los componentes esenciales para la reacción y las temperaturas óptimas de las tres fases de cada ciclo. Con la técnica optimizada se llevaron a cabo estudios de transmisión de la enfermedad. Se encontró transmisión a través de estacas. Aunque el nivel de severidad de la enfermedad afecta negativamente el enraizamiento, estacas de plantas asintomáticas infectadas y de plantas con síntomas moderados enraízan y presentan infección del patógeno en las nuevas plantas. Se detectó ADN del fitoplasma en plántulas germinadas de semillas de plantas enfermas. Esto sugiere una posible transmisión a través de semillas. Los insectos Empoasca hastosa, Lopidea murray, Alconeura sp. , Ollariamus sp. , Hydatothrips sp se identificaron como posibles vectores de EHPG, ya que se le detectó ADN del fitoplasma en sus tejidos.
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