Imagen de Portada
Código QR

Nya metoder för att detektera AhR-aktivitet i fiskceller

Toxicitetstester på bland annat fisk är ett viktigt verktyg för att samla kunskap om kemikaliers effekter i akvatiska miljöer. Samtidigt finns det flera anledningar att försöka minimera antalet tester på levande djur; till exempel ekonomiska, praktiska och inte minst djuretiska skäl. Ett alternativ...

Descripción completa

Autor principal: Eknefelt, Linnea
Formato: Second cycle, A2E
Lenguaje:sueco
sueco
Publicado: 2018
Materias:
Fisheries and aquaculture - General aspects
Chemistry
Acceso en línea:https://stud.epsilon.slu.se/13527/
_version_ 1855572260038901760
author Eknefelt, Linnea
author_browse Eknefelt, Linnea
author_facet Eknefelt, Linnea
author_sort Eknefelt, Linnea
collection Epsilon Archive for Student Projects
description Toxicitetstester på bland annat fisk är ett viktigt verktyg för att samla kunskap om kemikaliers effekter i akvatiska miljöer. Samtidigt finns det flera anledningar att försöka minimera antalet tester på levande djur; till exempel ekonomiska, praktiska och inte minst djuretiska skäl. Ett alternativ till dessa ekotoxikologiska djurförsök är användning av cellbaserade metoder in vitro. Odlade cellinjer från olika arter har använts inom forskningen i flera årtionden, däribland toxikologiska studier. I denna studie gjordes en serie försök med syftet att utforma en metod för mätning av aktivering av arylhydrokarbonreceptorn (AhR) i zebrafiskceller, som mått på toxisk påverkan. Det gjordes genom att cellerna transfekterades med en plasmid innehållande ett AhR-känsligt element som vid aktivering av Ah-receptorn inducerar transkription av luciferas, vars kvantitet sedan kunde mätas som luminiscens och på så vis fås ett mått på AhRaktiveringen. Även generell celltoxicitet mättes i parallella försök. Resultaten visade att TCDD och benzo(a)pyrene aktiverar AhR i varierande grad beroende på koncentration och cellinje (ZFL eller ZF4). B-naftoflavone gav endast aktivering i högsta koncentrationen som användes, 62,2 nM, hos ZFL, och ingen tydlig aktivering alls i valda koncentrationer hos ZF4. Dessutom gjordes försök med olika plasmidförhållanden, celldensiteter och användning av serumfritt medium för att försöka optimera metoden och göra den känsligare. Små förändringar kunde ses i dessa försök, som bör tas hänsyn till i utförandet. Dock skulle fler upprepningar behöva göras för säkrare resultat. Som bäst sågs en fold induction avseende reporteraktiviteten (AhRaktivitering -> luciferas -> luminiscens) på ca 12 för ZFL och 8 för ZF4 i de högsta koncentrationerna som användes. Den lägsta koncentrationen som gav en signifikant ökad reporteraktivitet var 1 nM hos ZF4 och 0,34 nM hos ZFL.
format Second cycle, A2E
id RepoSLU13527
institution Swedish University of Agricultural Sciences
language Swedish
swe
publishDate 2018
publishDateSort 2018
record_format eprints
spelling RepoSLU135272019-02-25T13:51:06Z https://stud.epsilon.slu.se/13527/ Nya metoder för att detektera AhR-aktivitet i fiskceller Eknefelt, Linnea Fisheries and aquaculture - General aspects Chemistry Toxicitetstester på bland annat fisk är ett viktigt verktyg för att samla kunskap om kemikaliers effekter i akvatiska miljöer. Samtidigt finns det flera anledningar att försöka minimera antalet tester på levande djur; till exempel ekonomiska, praktiska och inte minst djuretiska skäl. Ett alternativ till dessa ekotoxikologiska djurförsök är användning av cellbaserade metoder in vitro. Odlade cellinjer från olika arter har använts inom forskningen i flera årtionden, däribland toxikologiska studier. I denna studie gjordes en serie försök med syftet att utforma en metod för mätning av aktivering av arylhydrokarbonreceptorn (AhR) i zebrafiskceller, som mått på toxisk påverkan. Det gjordes genom att cellerna transfekterades med en plasmid innehållande ett AhR-känsligt element som vid aktivering av Ah-receptorn inducerar transkription av luciferas, vars kvantitet sedan kunde mätas som luminiscens och på så vis fås ett mått på AhRaktiveringen. Även generell celltoxicitet mättes i parallella försök. Resultaten visade att TCDD och benzo(a)pyrene aktiverar AhR i varierande grad beroende på koncentration och cellinje (ZFL eller ZF4). B-naftoflavone gav endast aktivering i högsta koncentrationen som användes, 62,2 nM, hos ZFL, och ingen tydlig aktivering alls i valda koncentrationer hos ZF4. Dessutom gjordes försök med olika plasmidförhållanden, celldensiteter och användning av serumfritt medium för att försöka optimera metoden och göra den känsligare. Små förändringar kunde ses i dessa försök, som bör tas hänsyn till i utförandet. Dock skulle fler upprepningar behöva göras för säkrare resultat. Som bäst sågs en fold induction avseende reporteraktiviteten (AhRaktivitering -> luciferas -> luminiscens) på ca 12 för ZFL och 8 för ZF4 i de högsta koncentrationerna som användes. Den lägsta koncentrationen som gav en signifikant ökad reporteraktivitet var 1 nM hos ZF4 och 0,34 nM hos ZFL. 2018-07-04 Second cycle, A2E NonPeerReviewed application/pdf sv https://stud.epsilon.slu.se/13527/1/eknefelt_l_180219.pdf Eknefelt, Linnea, 2018. Nya metoder för att detektera AhR-aktivitet i fiskceller. Second cycle, A2E. Uppsala: (VH) > Dept. of Biomedical Sciences and Veterinary Public Health (until 231231) <https://stud.epsilon.slu.se/view/divisions/OID-713.html> urn:nbn:se:slu:epsilon-s-9572 swe
spellingShingle Fisheries and aquaculture - General aspects
Chemistry
Eknefelt, Linnea
Nya metoder för att detektera AhR-aktivitet i fiskceller
title Nya metoder för att detektera AhR-aktivitet i fiskceller
title_full Nya metoder för att detektera AhR-aktivitet i fiskceller
title_fullStr Nya metoder för att detektera AhR-aktivitet i fiskceller
title_full_unstemmed Nya metoder för att detektera AhR-aktivitet i fiskceller
title_short Nya metoder för att detektera AhR-aktivitet i fiskceller
title_sort nya metoder för att detektera ahr-aktivitet i fiskceller
topic Fisheries and aquaculture - General aspects
Chemistry
url https://stud.epsilon.slu.se/13527/
https://stud.epsilon.slu.se/13527/

Ejemplares similares