| Summary: | Desde hace algunas décadas, la ganadería colombiana ha empezado a involucrar técnicas
biotecnológicas para la optimización de procesos reproductivos con el fin de mejorar su
competitividad y sostenibilidad. En este sentido, el grupo Reproducción Animal del Trópico de
AGROSAVIA ha dedicado parte de sus esfuerzos hacia el desarrollo de suplementos a base de
proteínas del plasma seminal bovino, que ayuden a mitigar el impacto que tiene la criopreservación
sobre la integridad y funcionamiento de los espermatozoides. De acuerdo con lo anterior, esta
propuesta plantea la producción recombinante, a través de sistemas procariotas, para dos proteínas:
Espermadhesinas 1, también conocida como aSFP y Osteopontina (OPN). Estas proteínas han sido
reconocidas por su papel protector en el espermatozoide bovino y su relación con la interacción
espermatozoide- ovocito. Para esto, las secuencias genéticas de cada proteína fueron insertadas en
plásmidos de Escherichia coli inducibles por IPTG, que contenían marcadores de selección por
antibióticos y una cola de seis histidinas (H6). Se evaluó la expresión de las proteínas bajo
diferentes condiciones (concentraciones de IPTG y temperatura), y se encontró que la mejor
expresión de aSFP-H6 se evidenció a 37 °C y 0.01 mM de IPTG, mientras las mejores condiciones
de expresión para OPN-H6 fueron 37 °C con IPTG de 0.1 mM. La aSFP-H6 obtenida, fue
purificada a través de columnas de afinidad a la histidina y se realizó un bioensayo para evaluar la
calidad seminal post-descongelación después de la adición de aSFP-H6 en diferentes
concentraciones (7.5 µg, 15 µg y 30 µg x 106
espermatozoides). Estos análisis mostraron que la
adición de aSFP-H6 disminuye notoriamente la motilidad espermática, efecto que se incrementa al
aumentar la cantidad de aSFP-H6.
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