Diferenciación de serovares de leptospiras patógenas mediante PCR del gen ligB y secuenciación = Differentiation of pathogenic leptospires spp by PCR of ligB gene and sequencing
La leptospirosis es la zoonosis de mayor distribución mundial. El objetivo del presente trabajo fue desarrollar una técnica molecular que diferencie leptospiras patógenas. Se amplificó mediante PCR y se secuenció una región de la adhesina ligB, presente solo en las especies patógenas. Se utilizar...
| Autores principales: | , , , |
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| Formato: | Artículo |
| Lenguaje: | Español |
| Publicado: |
Asociación Argentina de Microbiología
2018
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| Materias: | |
| Acceso en línea: | http://hdl.handle.net/20.500.12123/2980 https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0325754117300937?via%3Dihub https://doi.org/10.1016/j.ram.2016.11.008 |
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trabajo fue desarrollar una técnica molecular que diferencie leptospiras patógenas. Se
amplificó mediante PCR y se secuenció una región de la adhesina ligB, presente solo en las
especies patógenas. Se utilizaron los iniciadores ligBFpet y ligBRpet. Dichos iniciadores lograron
amplificar el ADN blanco de 6 cepas patógenas referenciales de Leptospira interrogans
(serovar Pomona cepa Pomona, serovar Canicola cepa Hond Utrecht IV, serovar Copenhageni
cepa M 20, serovar Wolffi cepa 3705, serovar Pyrogenes cepa Salinem y serovar Hardjo cepa
Hardjoprajitmo) y el de Leptospira borgpetersenii serovar Castellonis cepa Castellon 3; también
el de 4 cepas patógenas aisladas de bovino, porcino, rata y comadreja. En las 2 cepas
referenciales no patógenas utilizadas, Leptospira biflexa serovar Patoc cepa Patoc I y L. biflexa
serovar Andamana cepa Andamana, no hubo amplificación. La secuenciación de los productos
amplificados expuso una suficiente variación entre los serovares estudiados, que permite
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| institution | Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA -Argentina) |
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| spelling | INTA29802018-08-06T12:59:00Z Diferenciación de serovares de leptospiras patógenas mediante PCR del gen ligB y secuenciación = Differentiation of pathogenic leptospires spp by PCR of ligB gene and sequencing Martinez, Mara Leila Grune Loffler, Sylvia Romero, Graciela Noemi Brihuega, Bibiana Felicitas Leptospira PCR Secuencia Nucleotídica Nucleotide Sequence Reacción en Cadena de la Polimerasa Gen ligB Polymerase Chain Reaction ligB Gene La leptospirosis es la zoonosis de mayor distribución mundial. El objetivo del presente trabajo fue desarrollar una técnica molecular que diferencie leptospiras patógenas. Se amplificó mediante PCR y se secuenció una región de la adhesina ligB, presente solo en las especies patógenas. Se utilizaron los iniciadores ligBFpet y ligBRpet. Dichos iniciadores lograron amplificar el ADN blanco de 6 cepas patógenas referenciales de Leptospira interrogans (serovar Pomona cepa Pomona, serovar Canicola cepa Hond Utrecht IV, serovar Copenhageni cepa M 20, serovar Wolffi cepa 3705, serovar Pyrogenes cepa Salinem y serovar Hardjo cepa Hardjoprajitmo) y el de Leptospira borgpetersenii serovar Castellonis cepa Castellon 3; también el de 4 cepas patógenas aisladas de bovino, porcino, rata y comadreja. En las 2 cepas referenciales no patógenas utilizadas, Leptospira biflexa serovar Patoc cepa Patoc I y L. biflexa serovar Andamana cepa Andamana, no hubo amplificación. La secuenciación de los productos amplificados expuso una suficiente variación entre los serovares estudiados, que permite diferenciarlos. Leptospirosis is a zoonosis having worldwide distribution. The objective of this work was to develop a molecular technique to differentiate pathogenic Leptospira spp. A region of adhesin ligB, present only in the pathogenic species was amplified by PCR and sequenced. ligBRpet and ligBFpet primers were used, which amplified the target DNA from pathogenic L. interrogans reference strains serovars Pomona strain Pomona, Canicola strain Hond Utrecht IV, Copenhageni strain M 20, Wolffi strain 3705, Pyrogenes strain Salinem, Hardjo strain Hardjoprajitmo, L. borgpetersenii serovar Castellonis strain Castellon 3 and 4 pathogenic strains isolated from bovines, pigs, rats and opossums. L. biflexa serovars Patoc strain Patoc I and Andamana strain Andamana were not amplified. Sequencing of the amplified products exhibited sufficient variation among serovars, which differentiates them Instituto de Patobiología Fil: Martinez, Mara Leila. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología. Laboratorio de Leptospirosis; Argentina Fil: Grune Loffler, Sylvia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología. Laboratorio de Leptospirosis; Argentina Fil: Romero, Graciela Noemi. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología. Laboratorio de Leptospirosis; Argentina Fil: Brihuega, Bibiana Felicitas. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología. Laboratorio de Leptospirosis; Argentina 2018-08-06T12:46:49Z 2018-08-06T12:46:49Z 2018 info:ar-repo/semantics/artículo info:eu-repo/semantics/article info:eu-repo/semantics/publishedVersion http://hdl.handle.net/20.500.12123/2980 https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0325754117300937?via%3Dihub 0325-7541 https://doi.org/10.1016/j.ram.2016.11.008 spa info:eu-repo/semantics/openAccess http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/ Creative Commons Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0 International (CC BY-NC-SA 4.0) application/pdf Asociación Argentina de Microbiología Revista argentina de microbiología 50 (2) :126--30. (2018) |
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