| Sumario: | En el Centro Internacional de la Papa (CIP) se aisló, de una planta de papa asintomática ("Ticahuasi"), un virus con partículas baciliformes de diferentes tamaños; el cual fue codificado como SB-22. Las partículas de este virus fueron muy semejantes a las del mosaico de la alfalfa (AMV); pero estudios serológicos comparativos preliminares realizados con un aislamiento del AMV del Perú sugirió que el SB-22 no estaba relacionado al AMV. Esta investigación fue iniciada con el fin de identificar y caracterizar al virus codificado como SB-22, y determinar su distribución en el Perú en cultivares de papa. El tamaño de las partículas del SB-22 fluctuó dentro de un rango de 21 a 368 nm, con un ancho promedio de 25 nm. Se pudo distinguir más de cinco tipos de partículas virales en preparaciones purificadas, siendo las longitudes predominantes entre 21 a 60 nm. Las partículas baciliformes más grandes parecen ser la agregación de varias partículas virales por sus extremos. El valor para su relación A260 nm/A280 nm (E 260/280 nm) fue de 1.38 y el peso molecular de las subunidades de su cubierta proteica de 27,200 ± 1,500 daltons. En experimentos de inoculación mecánica conducidos con savia cruda de Physalis floridana que exhibía mosaico, bandeamiento de venas y deformación de hojas se determinó que el virus se transmite por savia; pero con cierta dificultad en los meses de verano del año. El pH de la solución de extracción de la savia fue un factor importante en el éxito de la transmisión, y el uso de 0.01M de 2-mercaptoetanol, pH 6.5 en la solución de extracción de la savia fue el más eficiente. El virus SB-22 tiene un amplio rango de hospedantes y es asintomático en muchas plantas indicadoras. Algunos hospedantes reaccionaron al SB-22 y al AMV con síntomas similares; pero los síntomas para AMV fueron más severos. Otros hospedantes reaccionaron con síntomas muy diferentes a los causados por el AMV. Las siguientes plantas son adecuadas para diferenciar el SB-22 del AMV (aislamiento peruano): Datura metel, D. stramonium, Lycopersicon esculentum, L. pimpinellifolium, Nicandra physalodes, Nicotiana benthamiana, N. rustica, Physalis floridana y Solanum tuberosum (clon DTO 28 y cv. Mariva). No se encontró un hospedante de lesiones locales. Los síntomas causados por el SB-22 variaron grandemente en los 16 clones de papa y el cv. Mariva estudiados, enfatizando la dificultad para detectar al SB-22 en plantas infectadas basándose sólo en la sintomatología. La mayoría mostró una infección asintomática; mientras que el clon DTO 28 y el cv. Mariva reaccionaron con un amarillamiento de la planta y una posterior acronecrosis y muerte de la planta. El virus fue transmitido por Cuscuta sp., por Myzus persicae aparentemente de manera semi-persistente y a través de la semilla sexual de P. floridana, S. tuberosum, C. annuum cvs. Golden Spike y Jalapeño en 10.28 %, 7.13 %, 11.76 % y 13.33 %, respectivamente. La reducción en la germinación de la semilla de P. floridana fue de 70.19 a 84.41 % y la de S. tuberosum de 13.84 %. Esta reducción estuvo asociada con la necrosis que el virus induce en estas semillas. El virus pudo ser detectado en la semilla sexual no germinada almacenados por un mes y 5 años, mediante DAS-ELISA. En savia de P. floridana, el SB-22 tiene un punto final de dilución entre 10-3 y 10-4, la inactivación térmica entre 55 y 60°C y la longevidad "in vitro" menor de 24 horas. Estas propiedades son similares a ciertas variantes y aislamientos del AMV. El virus fue purificado de extracto de tejidos de P. floridana por la homogeneización 5 volúmenes de tampón glicina 0.1 M pH, 8.4 conteniendo 0.01 M de MgCl2 más 0.2 - 0.1 % de 2-mercapt‹ietanol y 0.2 % de azida de sodio; seguido de una precipitación con 8 % de polietileno glicol (PEG) 8,000 y 0.2 M de NaCl, centrifugación diferencial y gradiente de sucrosa (30- 60 %). La baja concentración del virus en los tejidos de su hospedante y su facilidad de precipitar a bajas velocidades hacen difícil su purificación. Mayores rendimientos del virus (5.6 a 11.5 mg/Kg de tejido) se obtuvieron cuando el homogeneizado del tejido fue tratado con 5 % (v/v) de enzima Celluclast a pH 6.5 por 24 h y luego con vibración ultrasónica por 2 h antes de su precipitación con PEG. Se preparó un antisuero para este virus inyectando 50 µg de virus purificado a un conejo Nueva Zelanda mediante el método de inyecciones intradérmicas múltiples. Las pruebas serológicas de difusión en gel (Ouchterlony) y DAS-ELISA demostraron que el SB-22 no está relacionado al AMV; y que el SB-25 (un virus aislado del cv. Huayro procedente de Huancayo, Perú) es una variante del SB-22. En pruebas de protección cruzada, el SB-22 no protegió a D. metel, D. stramonium y N. physalodes contra la infección por el AMV. Estudios de microscopía de luz y electrónica en hojas de P. floridana y S. tuberosum infectados mostraron que el virus induce la formación de cuerpos de inclusión citoplasmáticos en células de la epidermis y del mesófilo. Estas inclusiones son amorfas, de diversos tamaños y formas, muy estables y numerosos en los tejidos del hospedante. La incidencia de este virus en el campo fue la siguiente: Cañete (3.63 %), Ica (4.72 %), Tarma (4.47 %), Concepción (28.57 %), Huancayo (12.39 %), Comas (Concepción) (55.30 %), La Libertad (Concepción) (88.40 %), Huasahuasi (Tarma) (88.10 %) y Cusco (15.10 %). En la Sierra peruana, Ia incidencia viral fue mayor que en la Costa. Este virus también ha sido detectado en Cajamarca, así como en Chile.
Las observaciones en invernadero y campo indican que la asociación entre la infección viral por el SB-22 y los síntomas de amarillamiento o infecciones asintomáticas dependen de las condiciones ambientales y del cultivar de papa involucrado. Los resultados de esta investigación presentan suficiente evidencia para considerar al SB-22 y al AMV como dos virus diferentes, y sugiere que el SB-22 es un nuevo miembro del Grupo del Mosaico de la Alfalfa. Por lo tanto, el SB-22 es considerado un nuevo virus que no ha sido descrito previamente; al cual proponemos el nombre de Virus del Amarillamiento de la Papa [Potato Yellowing Virus (PY V)].
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